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螞蟻淘/小鼠白細胞介素17A ELISA試劑盒(Mouse IL-17A ELISA KIT)/96T/M6144L
  • 螞蟻淘/小鼠白細胞介素17A ELISA試劑盒(Mouse IL-17A ELISA KIT)/96T/M6144L

螞蟻淘/小鼠白細胞介素17A ELISA試劑盒(Mouse IL-17A ELISA KIT)/96T/M6144L

價格: ¥2698.00 市場價: 4496.67

貨號: M6144L
品牌: ebiomall
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  • 使用說明
  • 常見問題
    • 產(chǎn)品概述:儲存條件 4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。

      組分

      24T

      48T

      96T

      使用方法

      開封后保存條件

      A.標準品

      250 pg

      250 pg

      2×250 pg

      按說明書進行稀釋

      -20℃可存放一月

      B.標準稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      4℃可存放一月

      C.濃縮生物素化抗體(100×)

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      D.生物素化抗體稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      E.濃縮酶結(jié)合物(避光100×)

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      F.酶結(jié)合物稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      G.濃縮洗滌液(20×)

      16 mL

      16 mL

      25mL

      即用型

      H.顯色劑(避光)

      6 mL

      6 mL

      12mL

      即用型

      I.終止液

      12mL

      12mL

      12mL

      即用型

      4℃或常溫保存

      J.預包被96孔板

      8×3

      8×6

      8×12

      即用型

      密封干燥4℃保存

      K.封板膠紙

      1張

      2張

      4張

      即用型

      注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請盡快用大量清水沖洗。產(chǎn)品介紹

      MouseIL-17AELISA Kit (MouseInterleukin-17A Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即小鼠白細胞介素17A ELISA試劑盒,可以定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組IL-17A濃度。白細胞介素17,也被稱為細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原8(CTLA-8),是二硫鍵相連的分子量為34 kDa的糖蛋白,主要由激活的小鼠αβTCR+CD4-CD8-胸腺細胞或人的CD4+記憶性T細胞產(chǎn)生。白細胞介素17家族(Interleukin 17 family,IL-17家族),是與白細胞介素17具有較高同源性、在脊椎動物進化中高度保守的一組蛋白質(zhì),目前共有六個成員,IL-17A(原IL-17)、B、C、D、E和F。其中,IL-17B、C、D、E、F的編碼基因,是在人類基因組大規(guī)模測序過程中,通過同源性分析、EST序列拼接得到的。已經(jīng)檢測到IL-17R在幾乎所有細胞和組織中均可表達,其中包括NK細胞、巨噬細胞、肥大細胞、前B細胞、成纖維細胞、胎肝細胞和腸上皮細胞。IL-17具有多種生物學效應。在體外,它可以誘導粘附細胞(如成纖維細胞、角質(zhì)形成細胞、巨噬細胞、上皮細胞和內(nèi)皮細胞)釋放的一些炎癥和/或造血細胞因子(包括TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、LIF、G-CSF、MCP-1)。IL-17還可以上調(diào)人類關(guān)節(jié)中的軟骨細胞產(chǎn)生氧化亞氮;誘導ICAM-1在成纖維細胞表面的表達,激活成纖維細胞和軟骨細胞中的在體內(nèi),IL-17可刺激小鼠血細胞生成和中性粒細胞。根據(jù)IL-17在體外和體內(nèi)的生物學效應可推測:IL-17是T細胞依賴的炎癥反應的一種重要調(diào)節(jié)劑。IL-17也可能是一種重要的連接免疫系統(tǒng)和造血作用的T細胞衍生介質(zhì)。目前研究發(fā)現(xiàn)IL-17與機體多種疾病相關(guān),特別是肺部感染、哮喘、類風濕性關(guān)節(jié)炎、器官移植、腸道炎癥等炎癥性疾病關(guān)系密切。本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣品中小鼠IL-17A濃度。在小鼠IL-17A單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品,其中的IL-17A會與其單抗結(jié)合,洗去游離成分;加入生物素化的抗小鼠IL-17A抗體,抗小鼠IL-17A抗體與結(jié)合在單抗上的小鼠IL-17A結(jié)合而形成免疫復合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,生物素與親合素特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物;加入顯色劑,若反應孔中有IL-17A,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色;加終止液變?yōu)辄S色。在450 nm下測OD值,小鼠IL-17A濃度與OD 450值之間呈正比,可通過繪制標準曲線計算出樣品中小鼠IL-17A濃度。
    說明書:UE-M6144S/M6144M/M6144L
    常見問題解答:◆背景信號強是什么原因?1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確??讌^(qū)域洗滌充分;確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液;增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結(jié)合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度,在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液;延長封閉時間。4.孵育時間過長??s短孵育時間。5.樣品或標準品中含干擾物質(zhì)。設置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。

    ◆沒有信號?1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗;檢查試劑配制方法;復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量;增加抗體用量(濃度)。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色?1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差?1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。

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