產(chǎn)品概述:儲存條件 4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。 組分
24T
48T
96T
使用方法
開封后保存條件
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A.標(biāo)準品
2000 pg
2000 pg
2×2000 pg
按說明書進行稀釋
-20℃可存放一月
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B.標(biāo)準稀釋液
16 mL
16 mL
16 mL
即用型
4℃可存放一月
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C.濃縮生物素化抗體(100×)
15μL
30 μL
2×30 μL
按說明書進行稀釋
(現(xiàn)配現(xiàn)用)
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D.生物素化抗體稀釋液
16 mL
16 mL
16 mL
即用型
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E.濃縮酶結(jié)合物(避光100×)
30 μL
60 μL
2×60 μL
按說明書進行稀釋
(現(xiàn)配現(xiàn)用)
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F.酶結(jié)合物稀釋液
16 mL
16 mL
16 mL
即用型
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G.濃縮洗滌液(20×)
16 mL
16 mL
25mL
即用型
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H.顯色劑(避光)
6 mL
6 mL
12mL
即用型
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I.終止液
12mL
12mL
12mL
即用型
4℃或常溫保存
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J.預(yù)包被96孔板
8×3
8×6
8×12
即用型
密封干燥4℃保存
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K.封板膠紙
1張
2張
4張
即用型
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注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請盡快用大量清水沖洗。
產(chǎn)品介紹 Mouse IFN-γ ELISA Kit (Mouse Interferon-γ Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即小鼠γ干擾素 ELISA 試劑盒,可以定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IFN-γ濃度。γ干擾素也稱為Ⅱ型干擾素,是細胞因子超家族中 IFN 家族的重要成員,具有廣泛的生物學(xué)功能,如抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)控細胞增殖和分化等。小鼠 IFN-γ基因定位于 10 號染色體,在 DNA 水平上 IFN-γ基因與 IFN-α/β基因無同源性。小鼠和人 IFN-γ在 DNA 水平上有 65%左右同源性,在氨基酸水平的同源性只有 40%左右。小鼠成熟 IFN-γ分子由 133 個氨基酸殘基組成,以同源雙體形式存在,分子量為 40 kDa,其生物學(xué)作用有嚴格的種屬特異性。小鼠 IFN-γR 基因定位于第 10 號染色體。IFN-γR 為跨膜糖蛋白,由兩個亞單位組成,胞膜外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū)分別有 228、21 和 223 個氨基酸殘基,從胞膜外區(qū)結(jié)構(gòu)特征來看,屬于細胞因子受體干擾素受體家族,最近命名為 CDw 119。IFN-γ與受體結(jié)合后可活化多種 IFN-γ調(diào)節(jié)的基因。目前已知,IFN-γ刺激后至少有 20 種蛋白被表達,其中 12 種是 IFN-γ刺激后所特有的。這種表達是由于活化特異的 DNA 結(jié)合蛋白使其從胞漿移位到胞核,如干擾素刺激的基因因子 2 (interferon-stimulated gene fac-tor 2, ISGF2)和γ-干擾素激活因子(gamma-interferon activation factor, GAF 或 STAT 91)結(jié)合到 IFN 基因啟動子中兩個稱之為 γ 干擾素活化點 (gamma-interferonactivation site, GAS)和干擾素刺激的反應(yīng)元件(interferon-stimulated response element, ISRE)的位置上。IFN-γ主要由活化 T 細胞產(chǎn)生,在小鼠,由 Th 1 亞群產(chǎn)生。當(dāng)抗原、PHA 或 ConA 刺激后 T 細胞分泌 IFN-γ。此外,活化的 NK 細胞也可產(chǎn)生 IFN-γ。其生物學(xué)作用具有較嚴格的種屬特異性。在許多病理情況下,IFN-γ作為疾病的標(biāo)志物的作用已得到證實。病毒感染時,IFN-γ產(chǎn)生。IFN-γ可作為鑒別結(jié)核性與非結(jié)核性腹水的診斷工具。IFN-γ在結(jié)核性腹水中的濃度顯著高于非結(jié)核性腹水,靈敏度和特異性均達到 100%。IFN-γ對多發(fā)性硬化癥的免疫治療的設(shè)計及檢測有重要意義。在移植物排斥反應(yīng)臨床癥狀出現(xiàn)前,IFN-γ的表達量增加;I 型糖尿病的初期,IFN-γ的產(chǎn)生顯著下降。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中小鼠 IFN-γ濃度。在小鼠 IFN-γ單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo)板中加入適度稀釋的樣品和標(biāo)準品,其中的 IFN-γ會與其單抗結(jié)合,洗去游離成分;加入生物素化的抗小鼠 IFN-γ抗體,抗小鼠 IFN-γ抗體與結(jié)合在單抗上的小鼠 IFN-γ結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,生物素與親合素特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物;加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有 IFN-γ,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色;加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值,小鼠 IFN-γ濃度與 OD 450 值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準曲線計算出樣品中小鼠 IFN-γ濃度。
說明書:UE-M6140S/M6140M/M6140L 常見問題解答:◆背景信號強是什么原因?1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保孔區(qū)域洗滌充分;確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液;增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結(jié)合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度,在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液;延長封閉時間。4.孵育時間過長??s短孵育時間。5.樣品或標(biāo)準品中含干擾物質(zhì)。設(shè)置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆沒有信號?1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復(fù)實驗;檢查試劑配制方法;復(fù)核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量;增加抗體用量(濃度)。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復(fù)溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色?1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預(yù)混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復(fù)使用導(dǎo)致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標(biāo)準曲線差?1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標(biāo)板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標(biāo)準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標(biāo)準曲線。
使用本產(chǎn)品的文獻:1.Scutellarin potentiates vancomycin against lethal pneumonia caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus through dual inhibition of sortase A and caseinolytic peptidase PAuthor links open overlay panelXingyeWang,LinWei,LiWang,XiaoyuChen,XiangriKong,YanheLuan,JiyuGuan,XueruiGuo,YanShi,TiedongWang,BingmeiWang,WuSong, YichengZhaoBiochemical Pharmacology