產(chǎn)品概述:儲存條件 4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。 組分
24T
48T
96T
使用方法
開封后保存條件
|
A.標(biāo)準(zhǔn)品
2000 pg
2000 pg
2×2000 pg
按說明書進(jìn)行稀釋
-20℃可存放一月
|
B.標(biāo)準(zhǔn)稀釋液
16 mL
16 mL
16 mL
即用型
4℃可存放一月
|
C.濃縮生物素化抗體(100×)
30 μL
60 μL
2×60 μL
按說明書進(jìn)行稀釋
(現(xiàn)配現(xiàn)用)
|
D.生物素化抗體稀釋液
16 mL
16 mL
16 mL
即用型
|
E.濃縮酶結(jié)合物(避光100×)
30 μL
60 μL
2×60 μL
按說明書進(jìn)行稀釋
(現(xiàn)配現(xiàn)用)
|
F.酶結(jié)合物稀釋液
16 mL
16 mL
16 mL
即用型
|
G.濃縮洗滌液(20×)
16 mL
16 mL
25mL
即用型
|
H.顯色劑(避光)
6 mL
6 mL
12mL
即用型
|
I.終止液
12mL
12mL
12mL
即用型
4℃或常溫保存
|
J.預(yù)包被96孔板
8×3
8×6
8×12
即用型
密封干燥4℃保存
|
K.封板膠紙
1張
2張
4張
即用型
|
注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請盡快用大量清水沖洗。
產(chǎn)品介紹 Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人血管內(nèi)皮生長因子 ELISA 試劑盒,可以定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 VEGF 濃度。人 VEGF 是由兩個相同亞基以二硫鍵交聯(lián)組成的二聚體糖蛋白,基因定位于第 6 號染色體長臂,由 8 個外顯子和 7 個內(nèi)含子交替構(gòu)成,約 14 kb。由于 mRNA 剪接方式不同,產(chǎn)生了單鏈分別含 121,145,165,183,189 和 206 個氨基酸的不同變異體。VEGF 121 分子量約為 34-46 kDa,是可溶性分泌型蛋白質(zhì),以游離狀態(tài)存在,不能與肝素結(jié)合;VEGF 165 分子量為 45 kDa,30-50%以可溶性形式分泌于細(xì)胞外基質(zhì),其余部分與細(xì)胞膜、基底膜或細(xì)胞外基質(zhì)含有肝素的糖蛋白結(jié)合。VEGF 145 存在于胎盤細(xì)胞和女性生殖道腫瘤細(xì)胞。VEGF 189 及 VEGF 206 分泌后完全結(jié)合于細(xì)胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。骨骼肌,心肌,肝細(xì)胞,成骨細(xì)胞,中性粒細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,角質(zhì)形成細(xì)胞,血小板,褐色脂肪組織,CD34 +細(xì)胞,星形細(xì)胞,神經(jīng)元和內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織均可產(chǎn)生 VEGF。血清和血漿樣本均可檢測到VEGF,由于血小板可釋放VEGF,因此血清中VEGF含量較高。VEGF是一種特異作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的多功能細(xì)胞因子,可增加血管通透性、促進(jìn)血管形成、引起細(xì)胞外基質(zhì)成分改變等。目前,VEGF 和 VEGFR 因其在腫瘤血管生成中的重要作用而成為抗腫瘤血管生成療法的重要靶點(diǎn)。目前應(yīng)用單克隆抗體、小分子抑制物、反義寡核苷酸,可溶性受體等方法通過阻斷其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路或耗竭腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的 VEGF,下調(diào) VEGF 或 VEGFR 的表達(dá),從而抑制腫瘤血管生成,切斷腫瘤血供,最終達(dá)到抑制腫瘤生長及轉(zhuǎn)移的作用。本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣品中人VEGF 濃度。在人VEGF單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo)板中加入適度稀釋的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,其中的VEGF會與其單抗結(jié)合,洗去游離成分;加入生物素化的抗人VEGF抗體,抗人VEGF抗體與結(jié)合在單抗上的人VEGF結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,生物素與親合素特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物;加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有VEGF,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍(lán)色;加終止液變?yōu)辄S色。在450 nm下測OD值,人VEGF濃度與OD 450值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中人VEGF濃度。