產(chǎn)品概述:產(chǎn)品參數(shù) 外觀:可溶于水的淺黃色固體 Ex/Em:328/533 nm CAS號(hào):103404-75-7 分子式:C11H7N2NaO3S2 分子量:302.3儲(chǔ)存條件 -20℃干燥避光保存,有效期見(jiàn)外包裝。 產(chǎn)品介紹活體成像技術(shù)(optical in vivo imaging)目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù),生物發(fā)光法是基于螢光素酶能催化底物化學(xué)發(fā)光的原理,將體外能穩(wěn)定表達(dá)螢光素酶的細(xì)胞株植入動(dòng)物體內(nèi),與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng),利用光學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)光強(qiáng)度,間接反映出細(xì)胞數(shù)量的變化或細(xì)胞的定位。這項(xiàng)技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域,最常用的有腫瘤或疾病動(dòng)物模型的建立,并可用于病毒學(xué)研究、siRNA研究、干細(xì)胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等。D-Luciferin是螢光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。在ATP和螢光素酶的作用下,螢光素能夠被氧化,并且在560 nm檢測(cè)到其化學(xué)發(fā)光。Luciferin由luc基因編碼,該基因作為報(bào)告基因在多種細(xì)胞中存在。由于化學(xué)發(fā)光的低背景性,luc基因在很低的表達(dá)水平下就可以被監(jiān)測(cè)到。此外,螢光素/螢光素酶被用來(lái)測(cè)量10-15摩爾量的ATP。 注意事項(xiàng)
1. D-Luciferin , Sodium Salt樣品的背景熒光主要來(lái)源于螢光素,如果不立即使用本產(chǎn)品,建議分裝后,-20℃避光保存。
說(shuō)明書:UE-D1007S/D1007L MSDS:MSDS D1007 D-Luciferin, sodium salt
常見(jiàn)問(wèn)題解答:◆底物的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射長(zhǎng)?化學(xué)發(fā)光,無(wú)需激發(fā)波長(zhǎng)。螢火蟲螢光素發(fā)射波長(zhǎng)是 560 nm。◆推薦儀器?多功能酶標(biāo)儀能用嗎?1、推薦儀器:具有生物化學(xué)發(fā)光檢測(cè)模塊。螢光素產(chǎn)生的光可以被光度計(jì)或閃爍計(jì)數(shù)器檢測(cè)。常見(jiàn)的活體成像儀器:如 IVIS? Lumina 小動(dòng)物活體成像系統(tǒng),德國(guó) Bruker公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小動(dòng)物活體成像儀。2、多功能酶標(biāo)儀:需要和儀器廠家確認(rèn)是否具體生物化學(xué)發(fā)光檢測(cè)模塊。注:不能用熒光顯微鏡。◆底物可以進(jìn)入活細(xì)胞中或者血腦屏障嗎?D-螢光素約280道爾頓,螢光素的水溶性和脂溶性都非常好,可以通過(guò)血腦屏障,胎盤屏障和血液測(cè)試屏障,也可以進(jìn)入活細(xì)胞。◆活體成像實(shí)驗(yàn),無(wú)效果的原因?成功進(jìn)行活體成像實(shí)驗(yàn)需要以下條件:1)目的組織或細(xì)胞表達(dá)螢光素酶基因;2)螢光素底物注射成功;3)依賴于發(fā)光部位的組織厚度。實(shí)驗(yàn)不成功,可從上述因素查找,螢光素酶基因是否表達(dá),螢光素底物是否未正確注射,及發(fā)光部位較深等◆產(chǎn)品不小心放在室溫下或暴露在光線下了,還可以用嗎?產(chǎn)品在室溫下可以穩(wěn)定保存很多天,因此產(chǎn)品很可能仍然可以正常工作。 為安全起見(jiàn),我們建議在處理大量樣品或珍貴樣品之前,先進(jìn)行小規(guī)模陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn),以確認(rèn)該產(chǎn)品仍然適用于您的應(yīng)用。◆兩者的區(qū)別是什么?螢光素鉀鹽和螢光素鈉鹽應(yīng)用上沒(méi)有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來(lái)看,鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn),兩者功效相同。◆活體成像有必要建立螢光素酶動(dòng)力學(xué)曲線嗎?注射方式,動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做螢光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定最佳信號(hào)平臺(tái)期和最佳的檢測(cè)時(shí)間。 使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn):1.Creating Red Light-Switchable Protein Dimerization Systems as Genetically Encoded Actuators with High SpecificityZhimin Huang, Zengpeng Li, Xiao Zhang, Shoukai Kang, Runze Dong, Li Sun, Xiaonan Fu, David Vaisar, Kurumi Watanabe,Liangcai GuACS Synth. Biol2.Antigen Capture and Immune Modulation by Bacterial Outer Membrane Vesicles as In Situ Vaccine for Cancer Immunotherapy Post-Photothermal TherapyYao Li,Kaiyue Zhang,Yao Wu,Yale Yue,Keman Cheng,Qingqing Feng,Xiaotu Ma,Jie Liang,Nana Ma,Guangna Liu,Guangjun Nie,Lei Ren,Xiao ZhaoSmall參考文獻(xiàn):1.Application of the firefly luciferase reporter gene應(yīng)用方向:體外化學(xué)發(fā)光分析2.Optical imaging of Renilla luciferase reporter gene expression in living mice應(yīng)用方向:活體成像3.Real-time measurements of acetylcholine-induced release of ATP from bovine medullary chromaffin cells應(yīng)用方向:高靈敏度 ATP 分析