產(chǎn)品概述：儲存條件 -20℃ 避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。 產(chǎn)品介紹 細(xì)胞增殖檢測是評估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。檢測細(xì)胞增殖最精確的方法是BrdU 法。EdU 法檢測試劑盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU（5-乙炔基-2’-脫氧尿苷）是一種嘧啶類似物，在 DNA 合成期整合入 DNA 雙鏈。EdU 法檢測基于“點(diǎn)擊”反應(yīng)，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴作用發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成共價(jià)鍵。 本試劑盒中，EdU 含有炔烴，YF?488/555/647A Azide 染料含有疊氮化合物。點(diǎn)擊法的 EdU 標(biāo)記增殖快速有效，易于使用。BrdU 方法需要 DNA 變性（如酸變性、熱變性或者用 DNase 消化）暴露出 BrdU，從而方便 BrdU 抗體結(jié)合；而EdU 法只需標(biāo)準(zhǔn)化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促滲就可以使檢測試劑進(jìn)入細(xì)胞，只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標(biāo)記出整合的 EdU。 本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組分，可以用于體外培養(yǎng)細(xì)胞的增殖檢測。
說明書：
UE-C6016S/C6016M/C6016L/C6016XL 常見問題解答：◆YF?488/555/594/647有什么區(qū)別？
主要就是檢測EDU的物質(zhì)帶的熒光基團(tuán)不同，檢測時(shí)發(fā)射熒光的顏色不同。實(shí)驗(yàn)效果相同，可根據(jù)偏好或需求進(jìn)行選擇。◆EdU試劑盒中，固定后3% BSA in PBS的作用是什么？清洗步驟中，BSA可以終止掉未反應(yīng)的甲醛。◆能否在活細(xì)胞中進(jìn)行Click-iT EdU檢測？不可以。雖然EdU是對活細(xì)胞進(jìn)行代謝標(biāo)記，但是疊氮化物檢測試劑和緩沖液組分是細(xì)胞非透過型，檢測信號時(shí)的Click反應(yīng)必須在固定和通透的樣品上進(jìn)行。◆質(zhì)粒轉(zhuǎn)染表達(dá)的熒光蛋白檢測與Click反應(yīng)兼容嗎？檢測順序是什么？本產(chǎn)品會影響GFP、RFP、mCherry等熒光蛋白的熒光，故染色后無法直接檢測GFP，建議使用GFP抗體間接檢測。◆觀測到較高的本底干擾，這是什么原因所致？如何減少本底干擾？疊氮化物和炔烴類間Click反應(yīng)非常有選擇性，生物體內(nèi)幾乎不可能有副反應(yīng)發(fā)生，所以本底較高一般是由洗滌不充分造成的。減少本底干擾的最佳方法是增加BSA洗滌的次數(shù)。同時(shí)，也可在同樣的檢測條件下設(shè)置一組同等處理的無染料或無Click反應(yīng)對照，以排除自發(fā)熒光干擾。此外，您還可在無EdU 體系中進(jìn)行完整的Click反應(yīng)，驗(yàn)證Click反應(yīng)信號的特異性。◆為什么標(biāo)記樣品無信號或特異性信號非常低？如何提高信號？1.請保證試劑使用時(shí)為無色的狀態(tài)，不要使用已經(jīng)變黃的添加劑或緩沖液；2.為確保Click反應(yīng)試劑能夠到達(dá)核內(nèi)，細(xì)胞需要充分地固定和通透；3.由于銅離子能結(jié)合到部分試劑上，這會導(dǎo)致催化Click反應(yīng)的有效濃度降低。所以在Click反應(yīng)前，不要在任何緩沖液或試劑中引入金屬螯合劑（例如EDTA、EGTA、檸檬酸鹽等），對某些含有這些物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)樣品來說，進(jìn)行Click反應(yīng)前，可能需要增加額外的洗滌步驟；4.當(dāng)銅離子在合適的化合價(jià)時(shí)，Click反應(yīng)才有效。Click反應(yīng)中用到的銅離子為二價(jià)銅(Cu2+)。5.延長Click反應(yīng)的時(shí)間至超過30分鐘也并不會提高信號。建議使用新鮮的Click反應(yīng)試劑再次進(jìn)行30分鐘的孵育，可更有效地提高標(biāo)記效率。◆如何對細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染？試劑盒中配有Hoechst 33342，可以在Click反應(yīng)后用于細(xì)胞核的染色，也可選擇使用DAPI。◆可以用于檢測植物細(xì)胞核內(nèi)的DNA復(fù)制嗎?可以。EdU是小分子，可以穿透植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn)：參考文獻(xiàn)1.A rapid and robust assay for detection of S-phase cell cycle progression in plant cells and tissUEs by using ethynyl deoxyuridine應(yīng)用方向：植物細(xì)胞2.A rapid non-radioactive techniqUE for measurement of repair synthesis in primary human fibroblasts by incorporation of ethynyl deoxyuridine (EdU)應(yīng)用方向：DNA修復(fù)3.Chick Embryo Proliferation Studies Using EdU Labeling應(yīng)用方向：EdU（動物）細(xì)胞增殖檢測4.Visualization of Mitochondrial DNA Replication in Individual Cells by EdU Signal Amplification應(yīng)用方向：線粒體活性檢測5.A method for evaluating the host range of bacteriophages using phages fluorescently labeled with 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU)應(yīng)用方向：細(xì)胞成像&細(xì)胞流式6.Human cytomegalovirus UL44 concentrates at the periphery of replication compartments, the site of viral DNA synthesis應(yīng)用方向：病毒活性檢測7.Labeling and Tracking of Mesenchymal Stem Cells with EdU應(yīng)用方向：細(xì)胞標(biāo)記示蹤
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